CN106526178A - 免疫层析法连续定量可读检测装置 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种免疫层析法连续定量可读检测装置，包括上壳体、与上壳体配合形成容置室的下壳体及设于容置室的试纸条，所述试纸条包括衬板及设在衬板上依次搭接的结合垫、反应垫和吸收垫，所述反应垫上沿结合垫指向吸收垫的方向依次设有质控线及检测区域带，所述检测区域带包被有与待检物相应的抗原或抗体；本发明的结构简单，检测方法步骤简便，易于操作，并且能够快速准确、定量的检测出待测物质的浓度，能够快速测定样本中待检物质的含量。

Description

免疫层析法连续定量可读检测装置

技术领域

本发明涉及生物检测技术领域，特别涉及一种免疫层析法连续定量可读检测装置。

背景技术

免疫层析法(immunochromatography)是近几年来国外兴起的一种快速诊断技术，其原理是将特异的抗体先固定于硝酸纤维素膜的某一区带，当该干燥的硝酸纤维素一端浸入样品(各种体液和分泌物)后，由于毛细管作用，样品将沿着该膜向前移动，当移动至固定有抗体的区域时，样品中相应的抗原即与该抗体发生特异性结合，若用免疫胶体金、免疫酶染色或免疫彩色乳胶颗粒可使该区域显示一定的颜色，从而实现特异性的免疫诊断。

自该技术出现以来发展十分迅速，应用也越来越广泛，目前几乎可应用于生物医学各研究领域，尤其是在医学检验中使用得更加普遍。该技术经过多年的使用，显示了众多的优势：操作简单易行，无需特殊设备，无毒无污染等；也存在一定的劣势：不易定量。

目前市场上常用的免疫层析方法为定性或半定量，使得结果为有无的判断或定量结果只是一个范围，从而使不够准确严谨；而精确的定量检测的方法包括化学发光法、时间分辨荧光法等，这些方法过程复杂，操作繁琐，需借助相应的分析检测仪器，耗时长；全自动的精密检测仪器虽能够实现对大样本量的快速检测，但仪器及试剂的耗费成本相当高，无法使快速定量检测的方法方便的应用于常规检测，普及推广，更无法达到个人的独立检测和实时便捷检测疾病的目的。对于众多的检测试剂，如HCG(人绒毛膜促性腺激素)，LH(人促黄体生成激素)等激素系列；AFP(甲胎蛋白)，PSA(前列腺特异抗原)等肿瘤系列等等，其检测结果阳性的高低意义相差甚远，代表了不同的疾病或者疾病的不同阶段。因此，实现定量检测的意义重大。

因此，为了弥补现有技术存在的上述缺陷，就需要一种免疫层析法连续定量可读检测装置，能够快速测定样本中待检物质的含量。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种免疫层析法连续定量可读检测装置，能够快速测定样本中待检物质的含量。

本发明的免疫层析法连续定量可读检测装置，包括上壳体、与上壳体配合形成容置室的下壳体及设于容置室的试纸条，所述试纸条包括衬板及设在衬板上依次搭接的结合垫、反应垫和吸收垫，所述反应垫上沿结合垫指向吸收垫的方向依次设有质控线及检测区域带，所述检测区域带包被有与待检物相应的抗原或抗体。

进一步，所述上壳体上设有与反应垫对应的用于观察检测区域带显色状况的观察孔，所述观察孔的边缘设有与检测区域带对应的用于显示被测物含量的浓度刻度线。

进一步，所述容置室还设有样品垫，所述样品垫的后端与结合垫相接触，所述上壳体设有与样品垫对应的用于加入样品的加样孔。

进一步，所述上壳体设有与样品垫前端对应的用于加入展开剂的层析展开剂孔。

进一步，所述加样孔的底部设有样品分离膜，所述样品垫与样品分离膜的下表面相接触。

进一步，本装置设置有至少两条试纸条；各所述试纸条的结合垫均与样品垫的后端相接触。

进一步，所述衬板一端上方设置结合垫，衬板另一端上方设置吸收垫，样品垫后端下方与结合垫的空白端重合，结合垫与吸收垫之间为反应垫。

进一步，所述上壳体与下壳体的一端铰接、另一端通过卡扣相连接。

进一步，所述反应垫为醋酸纤维膜垫或者硝酸纤维膜垫。

进一步，所述结合垫为乳胶垫或者纳米金垫。

本发明的有益效果：本发明的免疫层析法连续定量可读检测装置，由于试纸条的反应垫上设置了检测区域带，检测区域带含有浓度均匀分布且设立一定的线性范围的检测物，按照抗原抗体的免疫反应的饱和性原理，在连续反应过程中逐渐显色减弱从深到浅乃至不显色为反应终点，达到了免疫反应的连续可读的实验室定量检测效果；本发明的结构简单，检测方法步骤简便，易于操作，并且能够快速准确、定量的检测出待测物质的浓度，能够快速测定样本中待检物质的含量。

附图说明

下面结合附图和实施例对本发明作进一步描述：

图1为本发明第一种结构的结构示意图；

图2为本发明第二种结构的结构示意图；

图3为图1中A-A剖视图；

图4为本发明的试纸条的结构示意图。

具体实施方式

实施例一

如图1至图4所示：本实施例的免疫层析法连续定量可读检测装置，包括上壳体1、与上壳体1配合形成容置室的下壳体2及设于容置室的试纸条，所述试纸条包括衬板31及设在衬板31上依次搭接的结合垫32、反应垫33和吸收垫34，所述反应垫33上沿结合垫32指向吸收垫34的方向依次设有一条质控线33a及检测区域带33b，所述检测区域带33b包被有一定浓度且均匀分布的与待检物相应的抗原或抗体；检测区域带33b包被有与待检物相应的的抗原或抗体，此是实现免疫反应饱和性原理的基础；抗原或抗体的浓度决定该检测装置的线性与灵敏度；上壳体1用于盖合下壳体2，形成一定的保护作用；上壳体1、下壳体2均可采用医用塑料制成，上壳体1优选为透明结构；上壳体1与下壳体2可通过多种方式相连，例如所述上壳体1与下壳体2的一端铰接、另一端通过卡扣相连接，便于控制上壳体1开闭；试纸条用于各种体液样品和分泌物的定量检测，样品中凡能适于抗原抗体的反应的所有待检物的检测，包括病毒抗原或产生的抗体、细菌的代谢产物及其对抗物、激素及其产生的对抗物、肿瘤标记物的含量、药物的使用及其产生的对抗物等；衬板31一端上方设置结合垫32，衬板31另一端上方设置吸收垫34，样品垫后端下方与结合垫32的空白端(即不含相关颗粒的部分)重合，结合垫32与吸收垫34之间为反应垫33；衬板31可为聚苯乙烯构件或者聚乙烯构件，起到承托作用；下壳体2的上表面设有用于固定衬板31的衬板31固定部(例如可为卡槽结构)；结合垫32可为乳胶垫或者纳米金垫(包括胶体金垫)，胶体金垫或乳胶颗粒垫上含有定量的胶体金颗粒或乳胶颗粒结合的抗原或抗体，此定量设定是实现免疫反应饱和性原理的基础；吸收垫34可由吸水滤纸构成，通过毛细作用提供样品流动的动力；质控线33a用于检测试纸条的有效性，确定反应体系是否成立；反应垫33可为醋酸纤维膜垫或者硝酸纤维膜垫；由于试纸条的反应垫33上设置了检测区域带33b，检测区域带33b含有浓度均匀分布且设立一定的线性范围的检测物，按照抗原抗体的免疫反应的饱和性原理，在连续反应过程中逐渐显色减弱从深到浅乃至不显色为反应终点，达到了免疫反应的连续可读的实验室定量检测效果；本发明的结构简单，检测方法步骤简便，易于操作，并且能够快速准确、定量的检测出待测物质的浓度，能够快速测定样本中待检物质的含量。

本实施例中，所述上壳体1上设有与反应垫33对应的用于观察检测区域带33b显色状况的观察孔11，所述观察孔11的边缘设有与检测区域带33b对应的用于显示被测物含量的浓度刻度线11a；当样本中存在待检物质时，颜色变化应该是由深变浅乃至无色，此刻对照刻度线，在检测区域带33b未显色的与显色的交接处即为待检物的最终浓度的指示刻度并可读；所述容置室还设有样品垫4，所述样品垫4的后端与结合垫32相接触，所述上壳体1设有与样品垫4对应的用于加入样品的加样孔12；加样孔12可与现有的加样枪相配合，在加样孔12中可加入定量体积的待测样品，此设定也是实现免疫反应饱和性原理的基础；所述上壳体1设有与样品垫4前端对应的用于加入展开剂的层析展开剂孔13；所述加样孔12的底部设有样品分离膜5，所述样品垫4与样品分离膜5的下表面相接触；样品分离膜5有利于样品的过滤，尤其是对于细胞等干扰成分的过滤；如图1所述，容置室中可设置一条试纸条；也可如图2所示，容置室中设置有三条(实际可设置至少两条)试纸条，此时各所述试纸条的结合垫32均与样品垫4的后端相接触；以便于在同一个装置中可以进行相关的多个项目的检测。

该装置利用了免疫反应的饱和性原理——在一个固定的反应体系中固定抗原抗体的线性含量，根据标本在检测区域带反应的实际宽度所指示的刻度来完成定量检测；实际设定固定量的胶体金或乳胶颗粒的抗原或抗体的结合物和设定反应区域检测带的连续性是实现连续定量检测的基础，设置定量加样是在检测线性范围内来设定的；要实现连续检测定量，此三点是必须的。

实施例二

采用实施例一中的装置检测人体血液中乙肝表面抗体(HBs-Ag)含量：

人体血液中乙肝表面抗体(HBs-Ag)正常状态是检测不出来的或是阴性结果或定量方法检测其值<1U/ml，所以初步设定检测区的线性范围50U/ml，根据实验设计的需要，检测区(即检测线所在的区域)的线性范围也可以设定不同的数值。

本检测采用高度特异的抗原抗体反应原理及乳胶标记免疫层析技术—双抗体夹心法。

检测时，在加样孔12加入定量的全血(一种定量装置)，5-10秒后在层析展开剂孔13加入定量的展开剂，在展开剂的毛细张力作用下，被稀释的血浆向检测区方向运动，如果是阳性标本，则HBs-Ag先与预包被的乳胶颗粒结合的抗HBs-Ag的抗体反应生成结合物，该结合物或未结合的乳胶颗粒结合物随之向前运动，质控线33a显色，表示检测成立，检测区的硝酸纤维膜上包被且被固定的抗HBs-Ag的抗体与乳胶颗粒结合物反应，形成HBs-Ag抗体--HBs-Ag--HBs-Ag抗体的复合物，并开始出现显红色区带，颜色向前逐渐变浅直到不显色，此时显色与不显色的交叉点就是反应的终点，对应的浓度刻度就是HBs-Ag的具体含量。如果标本中不含HBs-Ag，则检测区域就不会显色，就表示为阴性。但质控线33aC不管在任何情况就会显色，否则就视为试剂失效。

例如：往加样孔12中加入定量全血，5-10秒后，加入定量展开剂，然后进行观察，10多分钟后，观察到，检测区显色停止，此点对应的浓度刻度为23U/ml，前方已经不显色，则可以得出，血液中的HBs-Ag含量为23U/ml。

实施例三

采用实施例一中的装置检测分泌物中沙眼衣原体抗原(CT-Ag)。

沙眼衣原体寄生于细胞内，按其特性分为三类，有15个血清型，其中有12个与沙眼和生殖道的感染有关，3个与性病性淋巴肉芽肿的发生有关。本法采用胶体金法，系用抗衣原体脂多糖单克隆抗体和羊抗鼠IgG多克隆抗体分别固定于固相硝酸纤维膜上，采用双抗体夹心法的形式建立衣原体抗原的定量检测方式。用于人体的各种分泌物中沙眼衣原体的检测。

将取得的分泌物放入准备好的样本管中，滴加溶解固定液A、B液，搅拌混匀10秒，盖上上壳体1，此过程标识标本准备完毕。

将准备好的标本滴5滴与加样孔12内，10秒中后于层析展开剂孔13滴加定量的展开剂，开始测试，样本中的衣原体抗原先与胶体金标记的抗衣原体脂多糖单克隆抗体结合，此结合物随着毛细作用向前展开，先与质控线33a上的羊抗鼠IgG抗体结合显色(表示检测成立)，随后继续展开，与检测区的硝酸纤维膜上固定的抗衣原体脂多糖单克隆抗体-Ⅱ形成复合合物而显色。

最后说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的宗旨和范围，其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。

Claims (10)

1.一种免疫层析法连续定量可读检测装置，包括上壳体、与上壳体配合形成容置室的下壳体及设于容置室的试纸条，所述试纸条包括衬板及设在衬板上依次搭接的结合垫、反应垫和吸收垫，其特征在于：所述反应垫上沿结合垫指向吸收垫的方向依次设有质控线及检测区域带，所述检测区域带包被有与待检物相应的抗原或抗体。

2.根据权利要求1所述的免疫层析法连续定量可读检测装置，其特征在于：所述上壳体上设有与反应垫对应的用于观察检测区域带显色状况的观察孔，所述观察孔的边缘设有与检测区域带对应的用于显示被测物含量的浓度刻度线。

3.根据权利要求2所述的免疫层析法连续定量可读检测装置，其特征在于：所述容置室还设有样品垫，所述样品垫的后端与结合垫相接触，所述上壳体设有与样品垫对应的用于加入样品的加样孔。

4.根据权利要求3所述的免疫层析法连续定量可读检测装置，其特征在于：所述上壳体设有与样品垫前端对应的用于加入展开剂的层析展开剂孔。

5.根据权利要求3所述的免疫层析法连续定量可读检测装置，其特征在于：所述加样孔的底部设有样品分离膜，所述样品垫与样品分离膜的下表面相接触。

6.根据权利要求4所述的免疫层析法连续定量可读检测装置，其特征在于：本装置设置有至少两条试纸条；各所述试纸条的结合垫均与样品垫的后端相接触。

7.根据权利要求3至6任一项所述的免疫层析法连续定量可读检测装置，其特征在于：所述衬板一端上方设置结合垫，衬板另一端上方设置吸收垫，样品垫后端下方与结合垫的空白端重合，结合垫与吸收垫之间为反应垫。

8.根据权利要求1至6任一项所述的免疫层析法连续定量可读检测装置，其特征在于：所述上壳体与下壳体的一端铰接、另一端通过卡扣相连接。

9.根据权利要求1至6任一项所述的免疫层析法连续定量可读检测装置，其特征在于：所述反应垫为醋酸纤维膜垫或者硝酸纤维膜垫。

10.根据权利要求1至6任一项所述的免疫层析法连续定量可读检测装置，其特征在于：所述结合垫为乳胶垫或者纳米金垫。